EVAGREEN® 染料用于 qPCR 和其他应用卓越的 qPCR 染料比 SYBR® Green 更亮且抑制性更小环保安全无诱变性、无细胞毒性且对水生生物安全，可安全处理并易于丢弃在排水管中熔解曲线分析唯一可让您进行 qPCR 和高-在同一反应中进行分辨率熔解 (HRM) 分析数字 PCREvaGreen® 染料与许多数字 PCR 平台兼容凝胶 DNA 可视化用于 Biotium 的所有基于染料的 qPCR 预混液，例如卓越的 Forget-Me-Not™ 预混液 EvaGreen® 和 EvaGreen® Plus：下一代 qPCR 染料EvaGreen® 染料是下一代 DNA 结合染料，非常适合定量实时 PCR (qPCR) 和许多其他应用。 Biotium 科学家在设计染料时考虑了多种要素与 PCR 相关的部分染料特性，包括 PCR 抑制、安全性、稳定性和染料的荧光光谱。我们努力的结果是一种优于 SYBR® Green I 和其他商用 PCR 或高分辨率熔解曲线 (HRM) 染料的染料。*EvaGreen® 染料用于 Biotium 的所有基于染料的 qPCR 预混液中，它结合了卓越的亮度和灵敏度，能够在同一反应中进行灵敏的熔解曲线分析。此外，EvaGreen® 染料无毒、无诱变性且对水生生物无害。EvaGreen® Plus 染料是 Biotium 原始 EvaGreen® 染料的改进替代品，它保留了相同的基本优点，同时提供了更强的信号-噪声比。 EvaGreen® Plus 较低的背景和较高的信号为数字 PCR 和等温应用提供了更多优势。访问 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR Master Mix 技术页面，详细了解我们的 qPCR 试剂的优势图 1. EvaGreen® 染料通过一种新颖的\"按需释放”机制与 dsDNA 结合。图 2. EvaGreen® 无毒、无诱变性且对水生生物无害。产品名称目录号尺寸 EvaGreen® 染料，20X in水（试用装）31000-T1 mLEvaGreen® 染料，20X 水溶液 310005 x 1 mLEvaGreen® 染料，2000X DMSO 溶液3101950 uLEvaGreen® Plus 染料，20X 水溶液（试用装）31077-T1 mLEvaGreen® Plus 染料，20X 水溶液310775 x 1 mL DNA 结合机制EvaGreen® DNA 结合染料是通过\"按需释放”机制使用 DNA 结合的新概念设计的（图 1）。该染料由两个单体 DNA 结合染料构成，通过柔性间隔物连接。在没有 DNA 的情况下，二聚体染料呈现环状构象，在 DNA 结合中没有活性。当 DNA 可用时，环状构象通过平衡转变为能够与 DNA 结合并发出荧光的随机构象。这种化学平衡提供了des 一种独特的机制，随着在 PCR 过程中形成更多的 DNA，从\"储备”（即呈环状构象的染料）持续提供染料的活性形式。因此，可以配制具有相对高染料浓度的 EvaGreen® 预混液，以在不抑制 PCR 的情况下最大化荧光信号，从而使该混合物适用于 qPCR 和 HRM 应用。*特性环保安全无诱变性、无细胞毒性且对水生生物安全由于其新颖的\"按需释放”DNA 结合机制，在检测扩增方面比 SYBR® Green I 更亮，因此在 qPCR 和等温扩增方面表现出色。无与伦比的 DNA 熔解曲线性能 低 PCR 抑制允许使用饱和染料浓度进行最大信号和高分辨率 DNA 熔解分析。在储存或 PCR 条件下非常稳定。在 PCR 反应后既可用作 qPCR 染料又可用作 DNA 凝胶染色剂操作，使用 UV 透照仪或蓝色灯箱直接在凝胶上可视化 PCR 产物，无需另一种凝胶染色。与多重 PCR 兼容 扩增子之间染料迁移的减少使得能够通过熔解曲线检测多个 PCR 产物。对其他有用应用 目前唯一用于微滴数字 PCR (ddPCR) 的 qPCR 染料。 EvaGreen® 还可用于等温扩增、微流体 PCR 系统、毛细管凝胶电泳等。卓越的 PCR 性能 PCR 染料通过形成染料-DNA 复合物来发射荧光。与 DNA 的相互作用不可避免地会导致一些 PCR 干扰。染料对 PCR 的抑制在 PCR 的早期阶段尤其严重，此时染料与 DNA 的比率很高。另一方面，足够的染料浓度对于产生良好的信号很重要。因此，必须使用最佳染料浓度以获得可靠的 PCR 性能。对于许多当前的 DNA 结合 PCR 染料，例如 SYBR® Green I，最佳染料浓度可能非常低，这限制了 PCR 信号，也使染料不适用于高分辨率熔解曲线 (HRM) 分析。此外，由于染料从小扩增子迁移到大扩增子，具有低 SYBR® Green 浓度的预混液可能无法通过解链峰检测多个扩增子，从而为 PCR 提供干净的单个扩增子的错误结果，实际上可能会产生图 3. 使用两种 EvaGreen® 预混液（Forget-Me-Not™ EvaGreen® 和 Fast EvaGreen®）和 QuantiNova SYBR® Green 进行的 qPCR 反应的原始荧光信号比较。 EvaGreen® 染料比 SYBR® 绿抑制性更小，信号更亮。液滴数字 PCR 的行业标准 vaGreen® 是唯一经过验证可用于液滴数字 PCR (ddPCR) 的 DNA 结合染料，请在此处查看完整的参考文献列表。突出显示引文：EvaGreen&r 展示的卓越性能例如;染料使其成为第一个也是唯一一个适用于 ddPCR 应用的 DNA 结合染料。 ddPCR 技术最初设计用于基于荧光探针的检测，通过将样品分成数千个可以单独测量的液滴，实现了定量多重 PCR。在分析化学的出版物中，McDermott 等人。演示如何将 EvaGreen® 染料与 ddPCR 结合使用，通过区分每个液滴的扩增 DNA 质量来分析样品中的多个目标。结果表明，基于 EvaGreen® 的 ddPCR 的性能与基于 TaqMan® 的 ddPCR 相当，并且没有增加荧光探针的复杂性和成本。 EvaGreen® 染料目前已获准用于 Bio-Rad 的 QX200 ddPCR™ EvaGreen® Supermix 和其他 ddPCR 相关试剂。EvaGreen® 染料安全性 EvaGreen® 染料相对于其他 PCR 和 HRM 染料的另一个主要优势是它的安全性。 EvaGreen® 染料是迄今为止第一种也是唯一一种对环境安全的 PCR 染料。尽管 PCR 在研究和诊断中的使用越来越多，而且 DNA 结合染料由于可能引起突变而具有固有的危险性，因此很少有 PCR 染料的安全性得到彻底研究。因此，处理和处置 PCR 预混液可以成为一个健康和环境问题。事实上，SYBR® Green I 被发现比最知名的诱变剂之一溴化乙锭更具环境毒性。 SYBR® Green I 被认为会干扰细胞中的 DNA 修复机制，因此它会增强化学物质的遗传毒性以及紫外线对 DNA 的损伤。尽管没有关于其他 PCR 和 HRM 染料（例如 SYTO9）的安全数据、LC Green、BRYT Green 和 ResoLight），众所周知，这些染料会在几分钟内进入细胞，因此具有潜在的遗传毒性风险。考虑到这一点，Biotium 的科学家设计了 EvaGreen® 染料，通过增加染料的分子大小和电荷使细胞膜不透水e（图 4）。由于 EvaGreen® 染料无法与活细胞中的基因组 DNA 相互作用，因此它比其他染料安全得多。独立实验室测试证实，EvaGreen® 不致突变、无细胞毒性并且对水生生物安全。该染料已通过加利福尼亚州的环境危险废物法规（CCR 标题 22），易于排放到下水道中。有关详细信息，请参阅 EvaGreen® 安全报告。EvaGreen® 染料稳定性 EvaGreen® 染料在储存期间和 PCR 条件下都非常稳定。据报道，EvaGreen® 染料在高达 65°C 的温度下可稳定用于实时 PCR 领域长达 6 个月（Mil Med. 2014 179(6):626-32）。SYBR® Green另一方面，已知 I 在多次冻融循环后和 PCR 条件下会降解。此外，据报道，分解的 SYBR® Green I 对 PCR 的抑制作用更强。因此，在评估 EvaGree 的性能时基于 n® 的预混液，您可以消除染料的稳定性作为变量。光谱兼容性 EvaGreen® 染料在光谱上与 FAM 或 SYBR® Green I 相似，这意味着使用基于 EvaGreen® 的预混液无需更改光学设置EvaGreen® 染料的其他应用 EvaGreen® 染料是目前唯一用于液滴数字 PCR (ddPCR) 的 qPCR 染料。EvaGreen® 染料已应用于许多其他应用，例如 Fluidigm® 微流体 PCR 系统、等温扩增、毛细管凝胶电泳、溶液中的 DNA 定量和细胞活力测试中死细胞的选择性检测。 Biotium 提供 EvaGreen® 独立染料、EvaGreen® qPCR 预混液和其他用于 qPCR 的试剂和试剂盒。图 4. EvaGreen® 染料比 SYBR® Green I 更安全，因为它是细胞膜不可渗透的，因此不能获得活细胞核中的 DNA。图 5. 熔解曲线分析使用 EvaGreen® 预混液 (Forget-Me-Not™ EvaGreen®) 或 SYBR® Green 预混液 (QuantiNova SYBR® Green) 的 GAPDH qPCR 产物。 EvaGreen® 染料对 PCR 的抑制作用低于 SYBR® Green，使您可以使用更多染料，从而获得更强的熔解曲线信号。*执行 HRM 可能需要 Idaho Technology 的许可。相关产品查看整个 EvaGreen® 染料产品线EvaGreen® Plus染料，20X 水溶液自：92 美元尺寸：试用装 (1 mL)，5 x 1 mL产品目录 #：31077-T，- 31077查看全部HideViewEvaGreen® 染料，20X 水溶液自：52 美元尺寸：试用装 (1 mL)，5 x 1 mL产品目录#：31000，- 31000-TView allHideViewForget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 预混液（低 ROX 或高 ROX）起价：63 美元规格：1 mL（100 次反应）试用装，5 x 1 mL（500 次反应），2 x 10 mL（2000 次反应）目录号：31045-1mL、31045-5mL、31045-20mL、31046-1mL、31046-5mL、- 31046-20mL查看全部隐藏查看Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR Master Mix（2-Color Tracking)起价：70 美元规格：1 mL（100 次反应）试用装，5 x 1 mL（500 次反应），2 x 10 mL（2000 次反应）目录号：31041-T、31041-1、31041-20mL、31042- T, 31042-1, - 31042-20mL查看全部隐藏查看相关类别PCR 和 DNA 扩增DNA 定量试剂盒，核酸定量和提取DNA/RNA 纯化试剂盒，DNA 凝胶染料和配件DNA/RNA 纯化试剂盒，核酸定量和提取RNA 定量试剂盒，核酸定量和提取qPCR 试剂DNA 定量试剂盒RNA 定量试剂盒DNA 凝胶染料及相关产品DNA 结合染料活性DNA/RNA 结合染料DNA/RNA 纯化试剂盒DNA 凝胶染料及相关产品标记核苷酸qPCR 试剂相关下载qPCR Master Mixes FlyerEvaGreen® 安全报告相关页面授权经销商请求批量报价